專題三土壤中分解尿素的細菌的分離與計數

《專題三土壤中分解尿素的細菌的分離與計數》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《專題三土壤中分解尿素的細菌的分離與計數（39頁珍藏版）》請在裝配圖網上搜索。

1、在微生物學中，將允許特定種類的微生物在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱作長的培養基，稱作選擇選擇培養基。培養基。以尿素為以尿素為唯一氮源唯一氮源的培養基的培養基牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨培養基培養基是是分離分離尿素尿素細菌細菌判斷該判斷該培養基培養基有無選有無選擇性擇性實驗組實驗組對照組對照組培養基類型培養基類型是否是否接種接種目的目的結果結果只生長尿只生長尿素細菌素細菌生長多種生長多種微生物微生物是是在設計實驗時，一定在設計實驗時，一定要涂布至少要涂布至少3 3個平板，作為重復組，才能增強實驗的說服力個平板

2、，作為重復組，才能增強實驗的說服力與準確性與準確性。在分析實驗結果時，。在分析實驗結果時，一定要考慮所設置的重復一定要考慮所設置的重復組的結果是否一致，結果不一致，意味著操作有誤，需要組的結果是否一致，結果不一致，意味著操作有誤，需要重新實驗重新實驗。旁欄思考題1.1.想一想，如何從平板上的菌落想一想，如何從平板上的菌落數推測出每克樣品中的菌落數？數推測出每克樣品中的菌落數？統計某一稀釋度下平板上的菌統計某一稀釋度下平板上的菌落數，最好能統計落數，最好能統計3 3個平板，計個平板，計算出平板菌落數的平均值，然后算出平板菌落數的平均值，然后按課本旁欄的公式進行計算。按課本旁欄的公式進行計算。計算

3、公式：計算公式：每克樣品中的菌株數每克樣品中的菌株數=（CV）M某同學在稀釋倍數為106的培養基中測得平板上菌落數的平均數為234，那么每克樣品中的菌落數是（涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1ml）()A.2.34108B.2.34109C.234D.23.4B（三）設置對照（三）設置對照判斷培養基中是否有雜菌污染：判斷培養基中是否有雜菌污染：將未接種的培養基同時進行培養。將未接種的培養基同時進行培養。判斷選擇培養基是否具有篩選作用：判斷選擇培養基是否具有篩選作用：完全培養基（營養成分齊全）接種后培養完全培養基（營養成分齊全）接種后培養觀察菌落數目。觀察菌落數目。主要目的是排除實驗組中非測試因

4、素對實驗主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度。結果的影響，提高實驗結果的可信度。從肥沃、酸堿度接近中性的濕潤土壤中取樣。先從肥沃、酸堿度接近中性的濕潤土壤中取樣。先鏟去表層土鏟去表層土3 cm3 cm左右，再取樣，將樣品裝入事先左右，再取樣，將樣品裝入事先準備好的信封中。準備好的信封中。取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。取土樣用的小鐵鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。由于初次實驗，對于稀釋的范圍沒有把握，因此選由于初次實驗，對于稀釋的范圍沒有把握，因此選擇了一個較為寬泛的范圍：擇了一個較為寬泛的范圍：稀釋倍數為稀釋倍數為103107。準備準備

5、牛肉膏蛋白胨培養基牛肉膏蛋白胨培養基和和選擇培養基。選擇培養基。每個稀釋每個稀釋度下需要度下需要3個選擇培養基，個選擇培養基，1個牛肉膏蛋白胨培養基。還個牛肉膏蛋白胨培養基。還需要需要8個滅菌試管和個滅菌試管和1個滅菌移液管個滅菌移液管。將稀釋相同倍數的菌液，在牛肉膏蛋白胨培養基上將稀釋相同倍數的菌液，在牛肉膏蛋白胨培養基上生長的菌落數目應明顯生長的菌落數目應明顯多于多于選擇培養基上的數目，因此，選擇培養基上的數目，因此，牛肉膏蛋白胨培養基可以作為對照，用來判斷選擇培養牛肉膏蛋白胨培養基可以作為對照，用來判斷選擇培養基是否起到了基是否起到了選擇選擇作用。作用。問題：問題：為什么分離不同的微生物

6、要采用不同的稀為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分釋度？測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍相同嗎？解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍相同嗎？實驗時要實驗時要對培養皿作對培養皿作好標記。注好標記。注明培養基類明培養基類型、培養時型、培養時間、稀釋度、間、稀釋度、培養物等。培養物等。1 1、取土用的小鐵鏟的盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。、取土用的小鐵鏟的盛土樣的信封在使用前都需要滅菌。2 2、應在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣倒入錐、應在火焰旁稱取土壤。在火焰附近將稱好的土樣倒入錐形瓶中，塞好棉塞。形瓶中，塞好

7、棉塞。3 3、在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作。、在稀釋土壤溶液的過程中，每一步都要在火焰旁操作。注明培養基種類、培養日期、平板培養樣品注明培養基種類、培養日期、平板培養樣品的稀釋度等。的稀釋度等。三、三、六、例題解析六、例題解析 例例1 1對細菌群體生長規律測定的正確的表述是對細菌群體生長規律測定的正確的表述是A A在液體培養基上進行在液體培養基上進行 B B至少接種一種細菌至少接種一種細菌 C C接種一個細菌接種一個細菌 DD及時補充消耗的營養物質及時補充消耗的營養物質 解析：細菌群體解析：細菌群體生長規律的測定生長規律的測定是人們在一定條件下進行的。是人們在一定條件下進行的

8、。這些條件是：一這些條件是：一種細菌、恒定容積的培養基，液體培養基、定種細菌、恒定容積的培養基，液體培養基、定時測定細菌總數時測定細菌總數。在這些條件下，才能測定出細菌的生長規律。在這些條件下，才能測定出細菌的生長規律。測定時只能用一種細菌的子細胞群體的變化規律表達微生物的測定時只能用一種細菌的子細胞群體的變化規律表達微生物的生長；恒定容積是給微生物提供一定的生存環境；液體培養基生長；恒定容積是給微生物提供一定的生存環境；液體培養基才能通過樣品推測細菌總數。若接種多種細菌，則會發生種間才能通過樣品推測細菌總數。若接種多種細菌，則會發生種間斗爭而不能測定一種微生物的生長規律。在接種時，要保證一斗

9、爭而不能測定一種微生物的生長規律。在接種時，要保證一定的接種量。定的接種量。答案：答案：A A例例2 2在微生物群體生長規律的測定中，種內在微生物群體生長規律的測定中，種內斗爭最顯著最激烈的時期是斗爭最顯著最激烈的時期是A A調整期調整期 B B對數期對數期 C C穩定期穩定期 DD衰亡期衰亡期解析：種內斗爭是一種生態因素。種內斗爭反應了種內生物解析：種內斗爭是一種生態因素。種內斗爭反應了種內生物對生存空間和生活資源的爭奪。在生活空間充裕，營養充足的時對生存空間和生活資源的爭奪。在生活空間充裕，營養充足的時候，種內斗爭的程度是比較低的。隨著微生物個體數目的增加，候，種內斗爭的程度是比較低的。隨

10、著微生物個體數目的增加，每個個體的生存空間越來越少，營養物質也越來越少，每個個體每個個體的生存空間越來越少，營養物質也越來越少，每個個體對生存空間和資源的爭奪也越來越激烈，種內斗爭就越來越激烈。對生存空間和資源的爭奪也越來越激烈，種內斗爭就越來越激烈。由此可知，在由此可知，在穩定期穩定期的種內斗爭最激烈。在衰亡期，微生物的數的種內斗爭最激烈。在衰亡期，微生物的數目已經開始減少，目已經開始減少，pHpH已經極度不適于微生物的生存，次級代謝產已經極度不適于微生物的生存，次級代謝產物積累到很高的程度，這時的微生物的生存斗爭主要是與無機環物積累到很高的程度，這時的微生物的生存斗爭主要是與無機環境的斗爭

11、。境的斗爭。答案：答案：C C例例3 3（20052005年江蘇）抗生素作為治療細菌感年江蘇）抗生素作為治療細菌感染的藥物，其高效性和巨大的經濟價值使抗生素工業染的藥物，其高效性和巨大的經濟價值使抗生素工業經久不衰。其中青霉素的發現和應用具有劃時代的意經久不衰。其中青霉素的發現和應用具有劃時代的意義。義。青霉素發酵產生青霉素。青霉菌的新陳代謝類型青霉素發酵產生青霉素。青霉菌的新陳代謝類型是是 ，青霉素是青霉菌的，青霉素是青霉菌的 代謝產物。代謝產物。在生產和科研中，常選用處于在生產和科研中，常選用處于 期的青霉菌作期的青霉菌作為菌種或研究材料，因為此時的青霉菌代謝旺盛，為菌種或研究材料，因為此

12、時的青霉菌代謝旺盛，和和 比較穩定。比較穩定。對青霉菌菌體生長情況的測定：取一定體積的發對青霉菌菌體生長情況的測定：取一定體積的發酵液，經離心分離、反復洗滌后，酵液，經離心分離、反復洗滌后，再計算，再計算發酵罐中菌體的總重量。發酵罐中菌體的總重量。異養需氧型異養需氧型次級次級對數對數個體的形態個體的形態生理特性生理特性稱菌體的濕重稱菌體的濕重（稱烘干后的重量）（稱烘干后的重量）1.1.使用選擇培養基的目的是（使用選擇培養基的目的是（）A.A.培養細菌培養細菌 B.B.培養真菌培養真菌 C.C.使需要的微生物大量繁殖使需要的微生物大量繁殖 D.D.表現某微生物的特定性狀與其他微生物加以區別表現某

13、微生物的特定性狀與其他微生物加以區別2.2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分別是()()A.CO A.CO2 2和和N N2 2 B.B.葡萄糖和葡萄糖和NHNH3 3 C.COC.CO2 2和尿素和尿素 D.D.葡萄糖和尿素葡萄糖和尿素C CD D3.3.下列說法不正確的是（下列說法不正確的是（）A.A.科學家從科學家從70708080度熱泉中分離到耐高溫的度熱泉中分離到耐高溫的TaqDNATaqDNA聚聚 合酶。合酶。B.B.統計某一稀釋度的統計某一稀釋度的5 5個平板的菌落數依次為個平板的菌落數依次為M1M1、M2M2、M3M3、M4M4、

14、M5M5，以，以M3M3作為該樣品菌落數的估計值。作為該樣品菌落數的估計值。C.C.設置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因設置對照實驗的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度 D.D.同其他生物環境相比，土壤中的微生物數量最大，同其他生物環境相比，土壤中的微生物數量最大，種類最多。種類最多。4.4.為培養和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養基中為培養和分離出酵母菌并淘汰雜菌，常在培養基中加入（）加入（）A.A.較多的氮源物質較多的氮源物質 B.B.較多的碳源物質較多的碳源物質 C.C.青霉素類藥物青霉素類藥物 D.D.

15、高濃度食鹽高濃度食鹽B BC C5、實驗測定鏈霉素對、實驗測定鏈霉素對3種細菌的抗生素效應，用種細菌的抗生素效應，用3種細種細菌在事先準備好的瓊脂塊平板上畫菌在事先準備好的瓊脂塊平板上畫3條等長的平行線（條等長的平行線（3條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于條線均與下圖中的鏈霉素帶接觸），將平板置于37條條件下恒溫培養件下恒溫培養3天，結果如圖所示。從實驗結果分析以天，結果如圖所示。從實驗結果分析以下敘述，不正確的是下敘述，不正確的是A鏈霉素能阻止結核菌的生長鏈霉素能阻止結核菌的生長B鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效鏈霉素對結核菌比對霍亂菌更有效C鏈霉素對結核菌比對傷寒菌更有效鏈霉素對結核菌比對傷寒菌更有效D鏈霉素可以用于治療傷寒病人鏈霉素可以用于治療傷寒病人D D練習題練習題v反芻動物的瘤胃中含有大量的反芻動物的瘤胃中含有大量的微生物，其中也包括分解尿素微生物，其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會物多為厭氧菌，接觸空氣后會死亡，因此分離其中能分解尿死亡，因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準備選擇素的微生物除了需要準備選擇培養基外，還應參照厭氧菌的培養基外，還應參照厭氧菌的培養方法進行實驗設計。培養方法進行實驗設計。