制備液相色譜

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1、第十章第十章 制備高效液相色譜制備高效液相色譜Preparative high performance liquid chromatography一、制備色譜分類一、制備色譜分類制備液相色譜制備液相色譜高速逆流色譜高速逆流色譜制備薄層色譜制備薄層色譜制備氣相色譜制備氣相色譜制備液相色譜法柱色譜柱色譜低壓及中壓色譜低壓及中壓色譜制備高效液相色譜制備高效液相色譜二、制備高效液相色譜二、制備高效液相色譜1.概述概述成本高，分辨率高，常用于樣品純化成本高，分辨率高，常用于樣品純化的最后階段。的最后階段。適于微量組分的分離純化適于微量組分的分離純化使用較小顆粒的固定相（使用較小顆粒的固定相（5-30um

2、)通常在超載的情況下使用通常在超載的情況下使用分類分析型液相色譜儀用于制備分析型液相色譜儀用于制備 使用常規分析柱（使用常規分析柱（4.6*250mm），制備量），制備量5-100ug半制備液相色譜，可使用分析型儀器半制備液相色譜，可使用分析型儀器 使用半制備柱（使用半制備柱（10mm i.d.），制備量），制備量20mm i.d.），制備量），制備量 10g分析型液相色譜與制備型液相色譜的比較分析型液相色譜與制備型液相色譜的比較分析型液相色譜分析型液相色譜制備型液相色譜制備型液相色譜目的目的優化目標優化目標試樣量試樣量柱負荷柱負荷流速流速分離要求分離要求色譜柱色譜柱檢測器檢測器試樣處理試樣處

3、理理論基礎理論基礎樣品的定性定量樣品的定性定量最大的峰容量最大的峰容量0.5mg越少越好，越少越好，10-10-10-3g/g填料填料0.5-1.0ml/min基線分離基線分離內徑內徑5mm，3-10 m必需，高靈敏度，寬線性必需，高靈敏度，寬線性和流動相一起摒棄和流動相一起摒棄線性色譜理論線性色譜理論樣品的分離、富集、純化樣品的分離、富集、純化最大的通量最大的通量半制備半制備0.1kg越多越好，越多越好，10-3-10-1g/g填料填料10ml/min中等分離度，與純度回收率有關中等分離度，與純度回收率有關內徑：內徑：10-1600mm，10-20 m最好有，適于大流量最好有，適于大流量收集，流動相循環使用收集，流動相循環使用非線性色譜理論非線性色譜理論2.制備基礎理論制備基礎理論柱的質量負載能力柱的質量負載能力3.制備實施步驟制備HPLC參考文獻：參考文獻：李瑞萍等李瑞萍等.高效制備液相色譜柱技術的研究進高效制備液相色譜柱技術的研究進展展.化學進展化學進展.2004,16(2),2741.劉國詮劉國詮.制備液相色譜技術制備液相色譜技術