生化試劑培訓課件幻燈片



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1、2021/8/21生化試劑培訓教材2021/8/22 一、臨床化學自動分析使用術語一、臨床化學自動分析使用術語 1、雙波長、雙波長 由主波長和副波長構成,可以消除對實由主波長和副波長構成,可以消除對實 驗結果的影響。主波長是生成的產物顏色對光吸收驗結果的影響。主波長是生成的產物顏色對光吸收的特有波長。副波長是為消除其他干擾物質在主波的特有波長。副波長是為消除其他干擾物質在主波長造成測定干擾所設定的波長。長造成測定干擾所設定的波長。2、反應杯空白、反應杯空白 在特定波長下,光通過以蒸餾水在特定波長下,光通過以蒸餾水或空氣為反應體系所測得的吸光度值?;蚩諝鉃榉磻w系所測得的吸光度值。第一部分 基本
2、術語2021/8/23 一 基本術語3、試劑空白、試劑空白 在特定波長下光通過以蒸餾水或生在特定波長下光通過以蒸餾水或生理鹽水和相應測定項目的試劑所構成的反應體系所理鹽水和相應測定項目的試劑所構成的反應體系所測得的吸光度值。測得的吸光度值。4、樣品空白、樣品空白 主要為了消除樣品本身混濁或色度主要為了消除樣品本身混濁或色度的干擾。常采用空白通道法,測定校正結果的干擾。常采用空白通道法,測定校正結果=顯色顯色反應通道結果反應通道結果空白通道結果。多數儀器須另外占空白通道結果。多數儀器須另外占用測定通道,分析速度減半。用測定通道,分析速度減半。2021/8/24 5、延遲時間、延遲時間 指試劑與樣
3、品混合后到監測開始之間的時間。指試劑與樣品混合后到監測開始之間的時間。一般用于兩點法和速率法。一般用于兩點法和速率法。注意:在速率法和兩點法中,延長延遲時間必然縮注意:在速率法和兩點法中,延長延遲時間必然縮短線性監測期,減少測定的線性范圍,也易發生底短線性監測期,減少測定的線性范圍,也易發生底物耗盡物耗盡.ALT,AST,BUN,HBDH等負反應試劑等負反應試劑,濃度,濃度極高時測值不一定是超線性,還有可能是底物耗盡極高時測值不一定是超線性,還有可能是底物耗盡而導致測值很低,這時要注意看線并且把吸光度界而導致測值很低,這時要注意看線并且把吸光度界限設定在限設定在0.5。當有吸光度界限超出報警進
4、行稀釋再。當有吸光度界限超出報警進行稀釋再測定。一般進行測定。一般進行10倍稀釋再做,如有超出繼續稀釋。倍稀釋再做,如有超出繼續稀釋。一 基本術語2021/8/256、線性范圍、線性范圍 指該試劑盒按其說明書使用時可準指該試劑盒按其說明書使用時可準確測量的范圍,線性是試劑的主要性能指標之一,確測量的范圍,線性是試劑的主要性能指標之一,如果試劑線性達不到要求,將直接影響高濃度樣如果試劑線性達不到要求,將直接影響高濃度樣本的檢測。線性的測量與儀器相關。本的檢測。線性的測量與儀器相關。7、標、標 準準 差差 標準差是標準差是方差方差的算術平方根。標準的算術平方根。標準差能反映一個數據集的離散程度。平
5、均數相同的,差能反映一個數據集的離散程度。平均數相同的,標準差未必相同標準差未必相同。一 基本術語2021/8/268、方差、方差 樣本中各數據與樣本平均數的差的平方樣本中各數據與樣本平均數的差的平方和的平均數叫做樣本方差。方差越大,樣本數據和的平均數叫做樣本方差。方差越大,樣本數據的波動就越大。的波動就越大。9、變異系數、變異系數 標準差與平均數的比值稱變異系數標準差與平均數的比值稱變異系數CV,又稱離散系數。變異系數可以反映單位均值又稱離散系數。變異系數可以反映單位均值上的離散程度。上的離散程度。一 基本術語2021/8/27 1、終點法、終點法 經過一定反應時間后,當反應達到平衡(終點)
6、時在指定的1個測光點測定吸光度做到的一點分析法。反應曲線如圖2-2所示:圖2-2 1點終點法反應曲線 分析項目:如總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)等。第二部分 測試和校準方法2021/8/28 圖2-2 1點終點法反應曲線一、測試方法吸光度時間(s)SB B1 B2 B3S+R1R212LLAA2021/8/29(2)2點終點點終點 在被測物反應尚未開始時,選擇第一個測光點,在反應到達終點或平衡時選擇第二個測光點,這2個測光點的吸光度之差用于計算樣本濃度,稱為2點終點法。一、測試方法2021/8/210 反應曲線如圖2-3所示:一、測試方法吸光度時間(s)SB B1 B2 B3S+R1R21(
7、)2MMAA12LLAA圖2-3 2點法終點分析項目:如酶法的肌酐(CRE)等。2021/8/211 2點速率點速率 測定測定2個測光點,此兩點既不測反應初始吸個測光點,此兩點既不測反應初始吸光度也不是終點吸光度,在單位時間內計算光度也不是終點吸光度,在單位時間內計算2點點間的吸光度之差用于樣本濃度的計算,稱為間的吸光度之差用于樣本濃度的計算,稱為2點點速率法,反應曲線如圖速率法,反應曲線如圖2-4所示:所示:一、測試方法2021/8/212 圖2-4 2點速率一、測試方法吸光度時間(s)SB B1 B2 B3S+R1R2反應界限水平(t)12LLAA1()2MMAA2021/8/213一、測
8、試方法一、測試方法速率法速率法A 根據兩測光點之間每分鐘吸光度的變化率計算濃度或活性值的測定方法,稱為速率A法,反應曲線如圖2-5示:吸光度時間(s)SB B1 B2 B3S+R1R2Al反應界限水平(t)分析項目:丙氨酸氨基轉移酶(ALT)2021/8/214二、常見校準方法(1)1點線性法(點線性法(K因數法)因數法)通過測定校準液1(試劑空白)的吸光度和輸入的K因數而得出的工作曲線圖2-6 1點線性校準曲線(K因數法)2021/8/215二、常見校準方法ALT,AST參數設置時,如果非本公司機器可以將試劑和樣本比改為30:1,即試劑1和試劑2和樣本比為240:60:10,通過校準確定K值
9、;這樣的好處是線性可以提高到1500U/L,抗干擾的能力提高1.5倍,弊端是CV值不夠理想,本公司的機器可以將試劑樣本比設置為20:1,即試劑1和試劑2和樣本比為240:60:15,通過校準確定K值。這樣的好處是線性可提高至1000U/L,并且兼顧了CV值。(e)適用的分析方法)適用的分析方法1點終點法、點終點法、2點速率法、點速率法、2點終點法、速率點終點法、速率A法法 2021/8/216二、常見校準方法(2)2點線性法點線性法 測定校準液1(試劑空白)與校準液2,形成 線性工作曲線,校準曲線如圖2-7所示:2021/8/217二、常見校準方法二、常見校準方法(3)多點線性法多點線性法通過
10、空白(或校準液1)和校準液(第2校準液及第6校準液)的測定用線性回歸制成線性工作曲線,校準曲線如圖2-8所示:圖2-8 多點線性校準曲線(線性)2021/8/218 (4)Logit-log3P(非線性法)(非線性法)適用于隨濃度升高而吸光度表現為收斂 的工作曲線,Logit-log3P(非線性法)校準曲線如圖2-9所示:三、常見校準方法圖2-9 Logit-log3P校準曲線(非線性法)2021/8/219 (5)Logit-log4P(非線性法)(非線性法)適用于隨濃度升高而吸光度表現為收斂 的工作曲線,Logit-log3P(非線性法)校準曲線如圖2-10所示:三、常見校準方法圖2-10
11、 Logit-log4P校準曲線(非線性法)2021/8/220 (6)Logit-log5P(非線性法)(非線性法)具有與Logit-log4P同樣的特征,由于此方法多一個計算參數 在某些情況下結果更加精確,校準曲線如圖2-11所示:三、常見校準方法圖2-11 Logit-log5P校準曲線(非線性法)2021/8/221 三、常見校準方法 圖2-12 指數函數校準曲線(非線性法)(7)指數函數法(非線性法)指數函數法(非線性法)工作曲線隨濃度的增加吸光度出現離散趨勢,校準曲線如圖2-12所示:2021/8/222 (4)Logit-log3P(非線性法)(非線性法)適用于隨濃度升高而吸光度
12、表現為收斂 的工作曲線,Logit-log3P(非線性法)校準曲線如圖2-9所示:三、常見校準方法圖2-9 Logit-log3P校準曲線(非線性法)2021/8/223(9)折線法(非線性法)折線法(非線性法)從校準液(1)測定到校準液(5)或(6),繪制出工作曲線。該工作曲線是將校準液各點的吸光度值用多條直線連接起來,校準曲線如圖2-14所示:圖2-14 折線法校準曲線(非線性法)2021/8/224根據校準液數量的不同,有四種不同的校準類型。1、空白校準、空白校準 只對校準液1(試劑空白)進行校準。注意事項:注意事項:當校準液的數量輸入“1”時(K因數法),只能進行試劑空白的校準。2、量
13、程校準、量程校準 只校準試劑空白液之外的1點校準液的方法。3、2點校準點校準 這是一種校準試劑空白液及另1校準液的校準方法。2021/8/225 這是一種校準試劑空白液及另1校準液的校準方法。4、多點校準、多點校準 對在“化學參數”窗體設定的校準液全數進行校準(包括試劑空白液),校準后校準結果被更新。適用校準方法適用校準方法 多點線性、Logit-Log 3P、Logit-Log 4P、Logit-Log 5P、指數函數、樣條、折線。2021/8/226一、分類和比較一、分類和比較 1、分類 按形態分 固體試劑和液體試劑 液體試劑又包括液體單試劑和液體雙試劑。2021/8/2272、比較、比較
14、 a 固體試劑固體試劑 優點優點 儲藏運輸方便,適合低端基層客戶。缺點缺點 使用時需要復溶,由于人為原因易 造成批間差。b 液體雙試劑液體雙試劑 優點優點 穩定性好,測值準確,適合全自動 生化分析儀。缺點缺點 在全自動分析儀上需要兩個試劑位。c 液體單試劑液體單試劑 優點優點 使用方便,適合半自動、全自動生化分析儀,在全自動分析儀上節省試劑位。缺點缺點 穩定性不如液體雙試劑。2021/8/228(一)酶促反應曲線或化學反應速度時間曲線觀察終點法試劑盒 (1)試劑空白吸光度值是否符合要求,試劑空白吸光度值大于規定標準,表示試劑質量有變化,會影響測定的精密度、準確度和線性。(2)試劑空白的反應速度
15、時間曲線平坦,吸光度值在整個反應期間變動不大,否則說明試劑本身不穩定,會導致測定偏差。(3)反應能否在規定時間內達到平衡。(4)反應穩定期觀察:反應達到平衡后,吸光度值最大并維持不變,這一期間為反應穩定期。2021/8/229(二)抗干擾作用觀察 雙試劑型試劑盒抗干擾作用強。(三)測定線性范圍 指該試劑盒按其說明書使用時可準確測量的范圍。2021/8/230三、失控情況的處理三、失控情況的處理重開一瓶質控品。更換同一批號的另一批質控品。更換另一批號的質控品。更換另一廠家的質控品。2021/8/231原因:1、試劑中含有下一個測試所要測定的底物,或是含有的某種試劑成分與下一反應所要測定的底物有作
16、用,因而直接干擾下一反應的測定結果;2、該試劑所引導的反應對下一個項目的反應進程帶來了間接的干擾,因為在有試劑污染的情況下,下一項目所測定的是前后兩個項目反應的綜合作用結果。2021/8/232一、肝功能測試項目一、肝功能測試項目 ALB,TP,ALT/GPT,AST/GOT,-GGT,SCHE,ALP,ADA,ICDH,GLDH,AMY,TBIL,DBIL,TBA,NH32021/8/233肝膽疾病的生物化學檢測肝膽疾病的生物化學檢測2021/8/234肝功能實驗的內容肝功能實驗的內容蛋白質代謝功能檢查蛋白質代謝功能檢查膽紅素代謝檢查膽紅素代謝檢查膽汁酸代謝檢查膽汁酸代謝檢查血清肝酶譜的檢查
17、血清肝酶譜的檢查2021/8/2351.肝臟的生理功能肝臟的生理功能1、代謝功能:三大物質(糖、蛋白質和脂類)的、代謝功能:三大物質(糖、蛋白質和脂類)的同化、儲存和異化;核酸代謝、維生素的活化和同化、儲存和異化;核酸代謝、維生素的活化和儲藏;激素的滅活及排泄;膽紅素、膽酸的生成;儲藏;激素的滅活及排泄;膽紅素、膽酸的生成;鐵、銅等金屬的代謝鐵、銅等金屬的代謝2、排泄功能:對膽紅素和某些染料的排泄、排泄功能:對膽紅素和某些染料的排泄3、解毒功能:生物轉化功能(同化、異化)、解毒功能:生物轉化功能(同化、異化)4、物質合成功能:凝血和纖溶因子、纖溶抑制因、物質合成功能:凝血和纖溶因子、纖溶抑制因
18、子的生成及對活性凝血因子的滅活清除子的生成及對活性凝血因子的滅活清除2021/8/236白蛋白白蛋白 albumin(ALB)測定值受體位影響;躺臥位時較直立時低。1、血清白蛋白濃度降低見于:(1)營養不良。如攝入不足或消化吸收不良。(2)消耗增加。如多種慢性消耗性疾?。▏乐亟Y核,甲亢或惡性腫瘤等)。(3)合成障礙。主要是肝功能障礙。若持續低于30g/L,則提示可能為慢性肝炎或肝硬化。(4)蛋白丟失過多。如急性大出血,嚴重燒傷以及慢性腎臟病變等。(5)較罕見的先天性白蛋白缺乏癥病例。2、血清白蛋白增高主要見于嚴重失水導致的血漿濃縮。2021/8/237總蛋白總蛋白 total protein(
19、TP)血清蛋白主要反映肝臟合成功能和腎臟病變造成蛋白丟失的情況。血清蛋白主要反映肝臟合成功能和腎臟病變造成蛋白丟失的情況。1、血清總蛋白增高可見于:、血清總蛋白增高可見于:(1)血清水分減少,使總蛋白濃度相對增加。)血清水分減少,使總蛋白濃度相對增加。(2)血清蛋白合成增加。如多發性骨髓瘤(主要是球蛋白增加)。)血清蛋白合成增加。如多發性骨髓瘤(主要是球蛋白增加)。2、血清總蛋白減少可見于:、血清總蛋白減少可見于:(1)血清水分增加,使總蛋白濃度相對減少。)血清水分增加,使總蛋白濃度相對減少。(2)營養不良。如攝入不足或消化吸收不良。)營養不良。如攝入不足或消化吸收不良。(3)消耗增加。如多種
20、慢性消耗性疾病。)消耗增加。如多種慢性消耗性疾病。(4)合成障礙。主要是肝功能障礙。)合成障礙。主要是肝功能障礙。(5)蛋白丟失。如急性大出血,嚴重燒傷以及慢性腎臟病變等。)蛋白丟失。如急性大出血,嚴重燒傷以及慢性腎臟病變等。2021/8/238丙氨酸氨基轉移酶丙氨酸氨基轉移酶 (ALT/GPT)ALT活力升高見于:活力升高見于:(1)肝膽疾病。)肝膽疾病。(2)心血管疾病。)心血管疾病。(3)其它疾?。阂认傺?、外傷、嚴重燒傷、休克等。)其它疾?。阂认傺?、外傷、嚴重燒傷、休克等。(4)藥物和毒物,如氯丙嗪、四氯化碳、有機磷等亦可)藥物和毒物,如氯丙嗪、四氯化碳、有機磷等亦可導致導致ALT活力上
21、升?;盍ι仙?。(5)溶血可導致)溶血可導致ALT活力升高,嚴重黃疸及渾濁血清應活力升高,嚴重黃疸及渾濁血清應稀釋后再進行測定。稀釋后再進行測定。2021/8/239天門冬氨酸氨基轉移酶天門冬氨酸氨基轉移酶 AST/GOT AST主要存在于心肌、肝、。血清AST活性升高。1、AST在心肌細胞內含量最高,心肌梗死時(MI)血清AST活力升高,18-24小時達高峰,AST峰值與梗死灶大小大致成比例。如果達參考值上限的10-15倍,往往有致死性的梗死發生。2、肝病。3、AST水平升高還見于進行性肌營養不良、皮肌炎、肺栓塞、急性胰腺炎、等。2021/8/240-谷氨酰轉移酶谷氨酰轉移酶 -GGT許多疾病
22、可導致血清-GGT水平升高,但以肝膽疾病最為常見。1、肝膽疾?。海?)肝內或肝后膽道梗阻患者血清-GGT上升最高。(2)原發性和繼發性肝病者-GGT水平也較高。(3)酒精性肝硬化、大多數重度酗酒者-GGT常升高。2、胰腺疾?。杭甭砸认傺?,胰腺腫瘤。2021/8/241膽堿酯酶膽堿酯酶 (SCHE)1、有機磷中毒時,有機磷中毒時,SCHE活性顯著降,活性顯著降,可用于有機磷中毒的診斷及預后估計??捎糜谟袡C磷中毒的診斷及預后估計。2、肝功能評價。、肝功能評價。2021/8/242堿性磷酸酶(堿性磷酸酶(ALP)ALP 主要存在于肝臟及骨骼。血清ALP活力升高常見于肝膽及骨骼疾?。?021/8/2
23、43腺苷脫氨酶腺苷脫氨酶 (ADA)1、獲得性免疫缺陷綜合癥(AIDS)紅細胞ADA活性特別高,血清中ADA活性也較高。2、腫瘤患者血清及組織中ADA活性均升高。2021/8/244亮氨酸氨基肽酶亮氨酸氨基肽酶(LAP)LAP測定主要用于輔助診斷各種類型的肝內外膽汁淤積性疾?。海?)肝膽胰惡性疾病。(2)肝膽胰良性疾病常妊娠時血清lAP活力增高。異檸檬酸脫氫酶(異檸檬酸脫氫酶(ICDH)ICDH活力是實質性肝臟疾病的敏感指標。2021/8/245谷氨酸脫氫酶谷氨酸脫氫酶 (GLDH)只要有肝細胞損害的存在,血清GLDH活力即增加。淀粉酶淀粉酶 (AMY)血清淀粉酶測定主要用于急性胰腺炎的診斷。
24、2021/8/246膽紅素膽紅素 Bilirubin1、血清總膽紅素測定反映了黃疸的程度。2、血清結合膽紅素的測定對診斷輕度肝細胞損害也有一 定幫助。2021/8/247膽汁酸膽汁酸 TBA代謝異常涉及多種消化系統疾病。代謝異常涉及多種消化系統疾病。與肝功能試驗聯合應用,可提高診斷價值。血氨血氨(NH3)1、生理性血氨增高見于進食高蛋白或運動后。2、理性血氨增高可見于重癥肝炎,肝腫瘤,肝昏迷,肝性腦病以及某種神經系統損害的疾病等。3、血氨在標本中極不穩定,因此采集血樣后應及時測定,并應避免溶血。2021/8/248腎臟功能及其生物化學檢查腎臟功能及其生物化學檢查 排泄水分、代謝產物、排泄水分、
25、代謝產物、廢物,保留有用物質廢物,保留有用物質 調節水分和滲透壓調節水分和滲透壓 調節電解質及酸堿平調節電解質及酸堿平衡衡 制造某些重要的生理制造某些重要的生理活性物質活性物質2021/8/249 腎功能測試項目腎功能測試項目 CRE、BUN、UA、CYS-C、RBP 尿尿 酸酸 (UA)尿酸是機體嘌呤代謝的最終產物。1、腎臟病變早期,血中尿酸濃度首先增加。2、痛風是由于長期高尿酸血癥,尿酸鹽沉積于關節腔及周圍軟組織,引起劇烈的炎癥反應。血尿素血尿素 (BUN)許多腎外因素可以影響血尿素水平:泌尿系結石、腫瘤、前列腺疾病使尿流受阻,會引起腎后性氮質血癥。2021/8/250肌酐肌酐 (CRE)
26、血肌酐濃度取決于機體產生和攝入與腎臟的排泄能力。肌酐苦味酸法 測試方法采用兩點法 該方法對儀器管路 系統影響較大。肌酐酶法 測試方法采用終點法 該方法測值準確,對儀器管路系統沒有影響。2021/8/251視黃醇結合蛋白(視黃醇結合蛋白(RBP)透射免疫比濁法,35-70mg/L。1、生理特性生理特性 由肝細胞合成,受視黃醇刺激并與之結合。由肝細胞合成,受視黃醇刺激并與之結合。2、功、功 能能 將視黃醇(將視黃醇(VitA)從肝細胞轉運到上皮細)從肝細胞轉運到上皮細 胞,血漿中胞,血漿中90與甲狀腺素結合前蛋白結與甲狀腺素結合前蛋白結 合,形成高分子的蛋白復合物。合,形成高分子的蛋白復合物。20
27、21/8/2523、臨床意義臨床意義(1)升高)升高 急性腎小球腎炎、糖尿病腎病、慢性腎衰伴急性腎小球腎炎、糖尿病腎病、慢性腎衰伴 近曲小管功能障礙。近曲小管功能障礙。(2)降低)降低 視網膜病變、病毒性肝炎、肝硬化、肺囊性視網膜病變、病毒性肝炎、肝硬化、肺囊性 纖維化、營養不良、甲狀腺功能亢進等。纖維化、營養不良、甲狀腺功能亢進等。2021/8/253血清胱抑素血清胱抑素C(CYS-C)CYS-C是評價腎小球濾過功能的敏感指標。是評價腎小球濾過功能的敏感指標。因其敏感度較低,故其測定方法需較高的分析靈敏度和因其敏感度較低,故其測定方法需較高的分析靈敏度和 較高特異性。較高特異性。2021/8
28、/254 三、心肌酶測試項目三、心肌酶測試項目LDH,-HBDH,AST/GOT,CK,CKMB2021/8/255LDH LDH水平升高常見于血管疾?。盒募」K?。-羥丁酸脫氫酶羥丁酸脫氫酶-hydrooxybutyrate dehydrogenase(-HBDH)-HBDH主要來源于心肌、腎。-羥丁酸脫氫酶(-HBDH)在心肌受損時釋放入血。(1)急性心肌梗死時血清-HBDH活力增高。(2)可用作肝和心臟疾病的鑒別診斷指標,心臟疾病時 血清-HBDH升高較肝病明顯。2021/8/256天門冬氨酸氨基轉移酶天門冬氨酸氨基轉移酶 (AST/GOT)1、急性肝炎 (各類病毒性肝炎)顯著增高,AST
29、/mAST 比值越小說明肝細胞損傷易轉發暴性肝炎。2、急性心肌梗死,心肌壞死時AST明顯增高。2021/8/257肌酸激酶肌酸激酶 CK/肌酸激酶同工酶肌酸激酶同工酶CK-MB1、血清CK活性升高見于心臟疾?。盒募」K?。2、影響結果的一些因素:(1)劇烈運動可使血清CK顯著上升。(2)嚴重溶血影響測定結果。(3)某些藥物如兩性霉素B環丙烷、可導致CK升高。2021/8/258四、血脂測試項目四、血脂測試項目 HDL-C,LDL-D,TG,TCHO,脂蛋白脂蛋白a,載脂蛋白A1,載脂蛋白B2021/8/259高密度脂蛋白膽固醇高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C)1、HDL-C的含量與心血管疾病的發
30、病率以及病變程度呈顯著負相關。HDL在動脈粥樣硬化或糖尿病時明顯降低。2、測定時注意事項:(1)采集前不宜改變飲食習慣和生活習慣。(2)臥位采血者其血脂測定值較坐位時低。(3)服用某些藥物(如避孕藥,甲狀腺激素,甾體激素等)可影響血脂水平。2021/8/260低密度脂蛋白膽固醇低密度脂蛋白膽固醇 (LDL-C)1、LDL-C的含量與心血管疾病的發病率以及病變程度相關。2、常與血清甘油三酯、總膽固醇以及其它脂蛋白(如高密度脂蛋白等)同時測定分析,以提高診斷價值。2021/8/261甘油三酯甘油三酯 (TG)1、血清甘油三酯增高常見于動脈粥樣硬化,糖尿病,腎病綜合征。2、血清甘油三酯減少見于甲狀腺
31、功能亢進,腎上腺皮質功能減退以及肝功能嚴重障礙等??偰懝檀伎偰懝檀?(T-CHO)1、血清高膽固醇與動脈9-粥樣硬化有關。2、血清膽固醇增高還可見于腎病綜合癥,糖尿病等。3、血清膽固醇減低可見于甲狀腺功能亢進,嚴重肝功能衰竭,溶血性貧血,感染和營養不良等。2021/8/262脂蛋白脂蛋白a 10140mmolL(0300毫克L)脂蛋白a是血液中脂蛋白的成分之一,與血 纖維蛋白溶解酶原有相同性質的糖蛋白。臨床意義臨床意義 增高:見于動脈粥樣硬化性心腦血管病、急性心肌梗死、家族性高膽固醇血癥、糖尿病、大動脈瘤及某些 癌癥等。減低:見于肝臟疾病、酗酒、攝入新霉素等藥物后。2021/8/263載脂蛋白
32、A1 apoA1 1.001.60gL 主要用于腦血管病風險度的估計。當apoA1降低時,腦血管病的風險加大。臨床意義 1生理性增高:妊娠、雌激素療法、鍛煉、飲酒。2病理性降低:I、A型高脂血癥、冠心病、腦血管病、apoA1缺乏癥、感染、血液透析、慢性腎炎、糖尿病、慢性肝炎、肝硬變。2021/8/264載脂蛋白載脂蛋白B ApoB 男男0.43-1.28克克L;女;女0.42-1.12克克L介紹介紹:載脂蛋白B主要在肝臟合成,可轉運脂類到肝外組織 臨床意義臨床意義:(1)apoB增高見于冠心病、糖尿病、腎病、營養不良、活 動性肝炎或肝功能低下、高脂血癥、甲狀腺機能低下 等。(2)apoB降低見
33、于急性肝炎、肝硬化、低脂蛋白血癥、甲狀腺機 能亢進等。(3)apoB增高是心、腦血管病的危險因素,與甘油三酯、膽固醇及 載脂蛋白A測定同時進行分析,結果更有意義。2021/8/265 血糖測試項目血糖測試項目 GLU正常人血糖正常人血糖3.896.11mmol/L 1、是糖尿病、低血糖癥診斷的重要依據,也是是糖尿病、低血糖癥診斷的重要依據,也是 治療糖尿病過程中觀測療效的指標之一。治療糖尿病過程中觀測療效的指標之一。2、測定時注意事項:測定時注意事項:(1)對血糖測定值的影響因素很多,如禁食時)對血糖測定值的影響因素很多,如禁食時間過短、各種應激因素等。間過短、各種應激因素等。(2)全血樣品中
34、的葡萄糖在室溫下能以每小時)全血樣品中的葡萄糖在室溫下能以每小時5%的速率進行酵解,如測定不及時,測定值的速率進行酵解,如測定不及時,測定值往往低于實際值。因此,在血液標本采集后,往往低于實際值。因此,在血液標本采集后,應盡快離心,分離出血漿進行測定。應盡快離心,分離出血漿進行測定。2021/8/266糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白 GHb反映取血前23月血糖的平均水平。為國際公認的糖尿病監測金標準,且應6.5。(1)是糖尿病患者血糖總體控制情況的指標 糖化血紅蛋白正常值為46,9為控制差。2021/8/267(2)有助于糖尿病慢性并發癥的認識(3)指導對血糖的調整(4)對判斷糖尿病的不同階段有一定
35、的意義(5)區別應激性血糖增高和妊娠糖尿病(GDM)中的檢測意義 腦血管急癥等應激狀態下血糖增高,但糖化血紅蛋白卻不增高。2021/8/268離子測試項目離子測試項目 K,Na,CL,Ca ,PHOS,Mg,Fe鉀鉀(K)1、低鉀原因:(1)由細胞外移至細胞內,見于堿中毒。(2)體內潴留下降:嘔吐、腹瀉或腸瘺致使液體從胃腸 道丟失。2、高鉀原因:(1)K+從細胞內移至細胞外:脫水,燒傷等。(2)排鉀減少:急、慢性腎功能衰竭,腎上腺功能不 全,使用保鉀利尿劑。(3)輸入過多。2021/8/269鈉鈉 (Na)臨床上細胞外液Na+150mmol/L稱為高鈉血癥。低鈉血癥:低鈉血癥可由鈉減少或水增多
36、引起,常見原因有:腎性因素:腎功能損害引起急、慢性腎功能衰竭等。非腎性因素:如嘔吐、腹瀉、腸瘺、大量出汗和燒傷等。2、高鈉血癥:(1)低滲性液體喪失:發生在滲透性利尿,多尿,大量出汗。(2)僅水分喪失。2021/8/270氯氯 (Cl)1、低氯常見于:(1)丟失過多:胃腸持續性分泌或嘔吐,酮癥酸中毒,腎衰,腎皮質激素過多,失鹽性腎?。ㄅ_慢性腎盂腎炎)。(2)高HCO3-血癥:見于代償性呼吸性酸中毒,代謝性堿中毒。2、高氯血癥(1)代謝性酸中毒:見于下消化道腹瀉。(2)食鹽攝入過多,或鹽水過度輸入。2021/8/271磷(無機磷)磷(無機磷)PHOS1、血清無機磷的增高見于甲狀旁腺功能減速退、多
37、發性骨髓瘤及骨折愈合期。2、血磷的降低見于甲狀旁腺功能亢進、磷吸收不良、骨質軟化癥、重癥糖尿病等。2021/8/272血清鎂血清鎂(Mg)1、血清鎂增高見于:(1)腎臟疾?。海?)內分泌疾病,如甲狀腺功能減退(3)治療措施不當,如用鎂制劑治療不當引起中毒,血鎂增高。2、經肌肉與中樞神經系統功能擾亂。3、血清鎂降低見于:長期禁食,吸收不良或是長期丟失胃腸液者。2021/8/273鈣鈣 (Ca)1、血清鈣的增高可見于甲狀旁腺功能亢進、骨腫瘤、。2、血清鈣的降低更多見,如嬰兒手足搐溺癥、維生素D缺乏癥、骨軟化癥。2021/8/274血清鐵血清鐵 (Fe)血清鐵增高見于:血清鐵增高見于:(1)紅細胞增
38、多時,如溶血性貧血。)紅細胞增多時,如溶血性貧血。(2)紅細胞再生或是成熟障礙,如再生障礙性貧血、巨幼紅細胞性)紅細胞再生或是成熟障礙,如再生障礙性貧血、巨幼紅細胞性貧血。貧血。(3)鐵吸收增加,利用減少或組織鐵釋放增加時。)鐵吸收增加,利用減少或組織鐵釋放增加時。2、血清鐵降低見于:、血清鐵降低見于:(1)鐵內總鐵不足,如泌尿道)鐵內總鐵不足,如泌尿道,鐵攝入不足或胃腸道病變,缺鐵,鐵攝入不足或胃腸道病變,缺鐵性貧血。性貧血。(2)鐵丟失增加,如泌尿道,胃腸道,生殖道的慢性長期失血。)鐵丟失增加,如泌尿道,胃腸道,生殖道的慢性長期失血。(3)鐵的需要量增加,如妊娠及嬰兒生長發育期。)鐵的需要
39、量增加,如妊娠及嬰兒生長發育期。2021/8/275一、免疫比濁一、免疫比濁 根據抗原體結合形成的抗原抗體復合物能引起液體介根據抗原體結合形成的抗原抗體復合物能引起液體介 質出現濁度改變的原理,依據過量抗體存在時抗原量與質出現濁度改變的原理,依據過量抗體存在時抗原量與 復合物形成成正相關的實驗動力學過程,建立起一種復合物形成成正相關的實驗動力學過程,建立起一種 液相化學免疫分析方法,稱透射比濁法。液相化學免疫分析方法,稱透射比濁法。2021/8/276二、免疫濁度法的分類二、免疫濁度法的分類 a、透射比濁、透射比濁 在光源的光路方向0測量透射光的強度和被檢溶液微粒濃度關系的方法稱透射比濁測定法
40、。b、散射比濁、散射比濁 在光源的光路方向596角的方向上測量散射光的強度和被檢溶液微粒濃度關系的方法稱散射比濁測定法。c、按形成復合物的速度測定可分終點濁度法和速率濁度、按形成復合物的速度測定可分終點濁度法和速率濁度法。法。2021/8/277三、乳膠比濁三、乳膠比濁 將待測物質相對應的抗體包被在直徑為將待測物質相對應的抗體包被在直徑為15-60nm的乳的乳 膠膠 顆粒上,使抗原抗體結合物的體積增大;光通過顆粒上,使抗原抗體結合物的體積增大;光通過 后,透射光和散射光的強度變化更為顯著,從而提高后,透射光和散射光的強度變化更為顯著,從而提高 實驗的敏感性。實驗的敏感性。2021/8/278五
41、、常見測試項目五、常見測試項目1、PA 血清前白蛋白血清前白蛋白2538mg/dl生理功能:生理功能:PA除了作為組織修補的材料外,還可視為一種運載蛋白,它結合T4與T3,而對T3親和力更大,PA與視黃醇結合蛋白形成復合物,具有運載維生素A的作用。臨床意義:臨床意義:(1)肝病 急性、亞急性重癥肝炎起病后一周內,PA的變化(降低)遠較血清ALB敏感。(2)惡性腫瘤 用于惡性腫瘤的篩查。(3)營養不良的評估 評價蛋白質和(或)熱卡缺乏的敏感指標。感染或組織損傷時降低;在無感染情況下,是兒童營養不良的敏感生化指標。2021/8/279CRP C反應蛋白反應蛋白 06.1 mg/L。作用:作用:識別
42、、啟動并把效應細胞及其產物從組織中清 除,如可能有毒性的或引起自身過敏的DNA。臨床意義臨床意義:(1)器質性疾病的篩選 急性或慢性炎癥;自身免疫或免疫復合??;組織壞死、惡性腫瘤。(2)并發感染的識別 病毒感染小于50 mg/L,極少超于100 mg/L;革蘭陰性感染有時高達500 mg/L;在腦膜炎和呼吸道感染中,CRP100mg/L就有力地證明是細菌性原發感染。(3)評估疾病活動性和療效監控。(4)預后價值 惡性感染性疾病、心梗等。2021/8/2803、抗鏈球菌溶血素抗鏈球菌溶血素0(ASO)0200U/mL 作用:ASO可為鏈球菌感染、診斷和監 控下列疾病提供有用的信息 扁桃體炎、耳炎
43、、丹毒、猩紅熱及相 關疾病,如風濕熱、腎小球腎炎。公司培訓教材2021/8/2814、類風濕因子、類風濕因子RF 020IU/mLa、生理作用、生理作用(1)調節機體免疫反應;)調節機體免疫反應;(2)激活補體,加快清除微生物感染。)激活補體,加快清除微生物感染。(3)清除免疫復合物,使機體免受循環復合物的損傷。只有)清除免疫復合物,使機體免受循環復合物的損傷。只有其超過一定滴度時才稱陽性。其超過一定滴度時才稱陽性。b、分類:分四類、分類:分四類 IgM、IgG、IgA、IgE型。其中型。其中IgA、IgM類濕因子易于檢測,而類濕因子易于檢測,而IgG類風濕因子難以檢測。類風濕因子難以檢測。c
44、、細菌、病毒感染引起體內產生的以變性、細菌、病毒感染引起體內產生的以變性IgG為抗原的一種為抗原的一種自身抗體。自身抗體。d、其他疾?。簩︻愶L濕性關節炎有一定價值,但無特異性。、其他疾?。簩︻愶L濕性關節炎有一定價值,但無特異性。如:風濕性疾病、蛋白代謝異常,以及有慢性抗原刺激的其如:風濕性疾病、蛋白代謝異常,以及有慢性抗原刺激的其他疾病,如系統性紅斑狼瘡、硬皮病、干燥綜合癥等。他疾病,如系統性紅斑狼瘡、硬皮病、干燥綜合癥等。2021/8/2825、補體、補體C3、C4生理作用生理作用 補體作為機體自然防御抗感染的一部分,有溶菌和防止免疫復合物沉積的生理效應。由于蛋白的消耗,補體系統的激活可使C
45、3/C4濃度降低。激活途徑:激活途徑:(1)經典途徑)經典途徑 以免疫復合物或抗體與細菌或病毒結合作為 刺激物。(2)旁路途徑)旁路途徑 為替代途徑,它的激活不依賴于抗體,而是 以微生物。旁路途徑的激活不需要C4分子的 參與。兩條途徑都需要C3分子,所以C3濃度 降低一般提示補體系統的激活,由于激活途 徑不同,C4可偏低或正常。2021/8/283臨床意義:臨床意義:C3 0.57-1.67mg/L 降低降低 腎小球腎炎、系統性紅斑狼瘡、感染、皮疹、肝 炎、肝硬化、關節疼痛。升高升高 各種傳染病、組織損傷和急性炎癥、肝癌。C4 0.44-0.66mg/L 降低降低 腎小球腎炎、系統性紅斑狼瘡病
46、毒感染、肝炎、肝硬化、類風濕性關節炎。升高升高 各種傳染病、急性炎癥、組織損傷、多發性骨髓 瘤、結節性動脈周圍炎、皮肌炎、心梗。2021/8/284免疫球蛋白免疫球蛋白a.IgG:主要活性主要活性:IgG是抗感染中最主要的抗體,多數抗菌、抗 病毒、抗毒素抗體都是IgG類。(1)唯一通過胎盤,自然被動免疫,對新生兒抗感染 有重要意義。(2)激活補體經典途徑:IgG1,2,3,需兩分子。(3)與自身免疫病有關:某些自身抗體(如抗核抗體)為 IgG,導致免疫損傷。2021/8/285IgM:主要活性和臨床意義:主要活性和臨床意義 (1)是個體發育中最早出現的Ig,胚胎后期的胎兒 即可合成。故臍血中I
47、gM增高提示胎兒有宮內 感染。(2)是抗原刺激后最早出現的抗體;抗原消失后其 水平首先下降。血清中IgM增高,提示有近期 感染和急性期感染。(3)主要存在于血流內,不易透過血管。有強大的 殺菌、激活補體、免疫調理作用(比IgG強500 1000倍)。故對早期防止菌血癥、敗血癥有重要 作用。2021/8/286 IgA:血清型血清型IgA:多以單體形式存在于血清:多以單體形式存在于血清 中,有抗菌、抗病毒、抗毒素的作用。中,有抗菌、抗病毒、抗毒素的作用。2021/8/287脂蛋白脂蛋白a 10140mmolL(0300毫克L)脂蛋白a是血液中脂蛋白的成分之一,與血 纖維蛋白溶解酶原有相同性質的糖
48、蛋白。臨床意義臨床意義 增高:見于動脈粥樣硬化性心腦血管病、急性心肌梗死、家族性高膽固醇血癥、糖尿病、大動脈瘤及某些 癌癥等。減低:見于肝臟疾病、酗酒、攝入新霉素等藥物后。2021/8/288載脂蛋白A1 apoA1 1.001.60gL 主要用于腦血管病風險度的估計。當apoA1降低時,腦血管病的風險加大。臨床意義 1生理性增高:妊娠、雌激素療法、鍛煉、飲酒。2病理性降低:I、A型高脂血癥、冠心病、腦血管病、apoA1缺乏癥、感染、血液透析、慢性腎炎、糖尿病、慢性肝炎、肝硬變。2021/8/289載脂蛋白載脂蛋白B ApoB 男男0.43-1.28克克L;女;女0.42-1.12克克L介紹介
49、紹:載脂蛋白B主要在肝臟合成,可轉運脂類到肝外組織 臨床意義臨床意義:(1)apoB增高見于冠心病、糖尿病、腎病、營養不良、活 動性肝炎或肝功能低下、高脂血癥、甲狀腺機能低下 等。(2)apoB降低見于急性肝炎、肝硬化、低脂蛋白血癥、甲狀腺機 能亢進等。(3)apoB增高是心、腦血管病的危險因素,與甘油三酯、膽固醇及 載脂蛋白A測定同時進行分析,結果更有意義。2021/8/290轉鐵蛋白轉鐵蛋白 TRF 20.834.7mmolL(1.873.12gL)轉鐵蛋白轉鐵蛋白 轉鐵蛋白濃度可以反映血清鐵的缺乏。臨床意義臨床意義(1)生理性增高:懷孕后期和口服避孕藥的婦女。(2)生理性降低:男性服用睪
50、丸酮,使用D-氨芐青素。(3)病理性增高:血清鐵缺乏時。如缺鐵性貧血,此時鐵飽和度很低。(4)病理性降低:a.貧血是由于紅細胞對鐵的利用障礙(如再生障礙性貧血),則血漿中TRF正?;虻拖?,但鐵的飽和度增高。b.嚴重肝病顯著下降;c.任何感染狀態和嚴重疾病時。要求空腹12小時取靜脈血。2021/8/291 迪瑞液體生化試劑特點 1均為液體雙試劑,適用于各類型全自動及半自動生化分析儀。2穩定性好,有效期一般為12個月。3方法學先進,采用國際上通常推薦方法(IFCC).4品種齊全。5準確度高 6精密度高,批間差及皮內差小。2021/8/2922021/8/2931.試劑間可能發生的干擾情況(1)AL
51、T,AST試劑中含有高活力LDH成分,有可能會對LDH 的測定帶來干擾。2)ALP,CK,CK-MB,CO2,AMY等試劑中使用磷酸緩沖液,可能會對其后的Mg離子測定帶來干擾。3)CHO,TG,GLU,UA,a-HBDH等試劑使用磷酸鹽緩沖液,可能會對無機磷的測定帶來干擾。4)CK,CK-MB試劑中含有GLU成分,可能對GLU測定帶來干擾,尤其對GLU的HK法測定帶來 干擾。5)Mg離子試劑中含Ca離子絡合劑,可能對Ca離子的測定帶來干擾。6)個別試劑以甘油做酶的保護劑,因此可能對TG的測定帶來干擾。2干擾的避免兩個項目間至少要有一個非干擾項目,而最徹底的做法是將被干擾項目置于干擾項目之前3排
52、序。ALT,AST,ALP,GGT,CHE,TP,ALB,TBIL,DBIL,BUN,UA,CRE,CK,CK-MB,HBDH,LDH,GLU,TG,TC,HDL-C,LDL-C,aPOA1,Apob,AMY.CO2,P,Fe,Ca,Mg.2021/8/294一點終點和兩點終點設定的區別在單試劑分析加入試劑的初期,或雙試劑分析中第二試劑加入之初,如指示反應吸光度尚未明顯變化,則可在此時選擇第一個吸光度,在指示反應終點時選擇第二個吸光度,從而設置成兩點終點法,但指示反應初期吸光度無明顯變化的花學反應較少,如單試劑方式測定TP,ALB,CA,MG.,P.等終點法分析項目,及雙試劑方式測定GLU,CHO,TG,等的終點法分析項目,因反應初期吸光度已有明顯變化,因而均難用設置兩點終點法,但在雙試劑分析中,如果將第一吸光度選擇在第二試劑加入前,此時指示反應一般尚未開始,則能容易設置兩點終點法。兩點終點法能有效地消除溶血,黃疸,和脂血等樣品本身光吸收造成的干擾。部分資料從網絡收集整理而來,供大家參考,感謝您的關注!
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