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1、首先，讓我們鄭重地為在實驗中為科學事業壯烈犧牲的兔子先生或小姐們默哀上一秒鐘，感謝它們對大家做出的貢獻。12 臨床，在正在使用鈣通道阻滯劑的老年患者中，使用克拉霉素的患者與同時使用阿奇霉素的患者相比，30天內因急性腎臟損傷風險導致的住院率更高。臨床上常用的大環內酯類藥物如克 拉 霉 素，是 細 胞 色 素 P 4 5 0 3 A（CYP3A4酶）的重要抑制劑。但是阿奇霉素在抑制細胞色素P4503A4方面作用較小。3 此外，有研究表明，對于老年患者，如果聯用依賴CYP3A4代謝的他汀藥物（如阿托伐他汀、辛伐他汀、和洛伐他?。┡c克拉霉素，而不是同時使用此類他汀藥物和阿奇霉素，那么老年患者因橫紋肌溶
2、解、急性腎臟損傷所致的住院風險以及全因死亡率將增加。這些均表明克拉霉素對鈣通道阻滯劑在治療疾病上（高血壓）有影響。4 學習家兔高血壓模型制作，家兔急性腎動能損傷的模型，觀察 鈣通道阻滯劑分別與克拉霉素和阿奇霉素聯用對家兔腎損傷的風險，掌握尿常規檢驗法及血漿尿氮的測定方法。5 手術臺，手術器械，medlab生物信號采集處理系統，752型紫外分光光度計，三通管，壓力換能器，不同規格的注射器，20%的烏拉坦，1%肝素溶液，鈣通道阻斷劑（硝苯地平注射液）克拉霉素注射液，阿奇霉素注射液，5%葡萄糖溶液，2%的草酸鉀溶液，尿素氮顯示劑，尿素氮標準液，蒸餾水，生理鹽水，注射用水等6 實驗前實驗前：高血壓模型
3、的制備：家兔模型采用噪聲刺激，每天2次，每次2h，約10d家兔可形成高血壓。另外，同時對家兔進行高鹽飲食，有助于家兔高血壓的形成與維持。硝苯地平溶液的制備：取2.55mg，加5%葡萄糖注射液250ml稀釋后在48小時內緩慢滴入。7 1、實驗計算機參數設置。打開計算機，啟動MedLab生物信號采集處理系統，按下列進行本實驗的計算機參數設置。采樣 參數 顯示方式 連續記錄 采樣間隔 1ms 采樣通道 1（DC）處理名稱 血壓（kPa）放大倍數 200 濾波 全通10kHz X軸壓縮比 100:1 Y軸壓縮比 8:1 8 2、取家兔稱重后，耳緣靜脈緩慢注入20烏拉坦溶液（3-4ml/kg），全麻家兔
4、，同時密切觀察家兔的肌張力和反射等的變化估計合適的麻醉劑用量。3、動物固定：將動物仰臥固定于兔手術臺上，頸前部和腹部等手術部位剪毛備皮。4、氣管插管：頸部剪毛，正中切口，切口長約57cm，逐層鈍性分離組織，暴露出氣管并在其下穿一根粗結扎線，在氣管上剪一“T”形切口，插入氣管插管并結扎固定。5、逐層鈍性分離頸前部組織，在胸鎖乳突肌內側下方鈍性分離出左側頸總動和右側頸內靜脈，分離的長度約2.53cm。，分別置雙線備用。9 6、左頸總動脈插管 動脈插管前，遠心端必須先結扎，用動脈夾夾住近心端。然后在頸總動脈遠心端結扎部位用眼科剪刀剪開動脈，開口大小約為動脈壁的三分之一（注意遮掩，小心噴血）。插入前端
5、已剪成斜口的動脈插管，結扎固定導管。該動脈導管已充滿0.7肝素溶液，并經三通開關與血壓的壓力換能器相連接。記錄一段正常呼吸、血壓曲線。7、右側頸內靜脈進行靜脈插管：提起近心端的線，于血管充盈后結扎遠心端，靠近結扎線處剪一小口，將已排完空氣的靜脈插管插入右側頸外靜脈內57 cm，并結扎、固定。108、在恥骨聯合上局麻后作下腹部正切口，長約5 cm，找到膀胱，在其背面膀胱三角區找到并鈍性分離分離雙側輸尿管，結扎遠心端。在靠近結扎線處用眼科剪向前沿45度角剪一小口，插入輸尿管導管并結扎固定（兩側相同），用試管收集每分鐘尿滴數或尿量。9、耳源靜脈注射1%肝素溶液1ml/kg，進行動物的全身肝素化10、
6、取硝苯地平注射液，靜脈滴注。（實驗前準備：取2.55mg，加5%葡萄糖注射液250ml稀釋后在48小時內緩慢滴入），觀察動脈血壓的變化。同時，a組靜脈注入克拉霉素注射液（1015mg/kg，加入5%葡萄糖注射液使最終濃度為1.02.0mg/ml，），b組靜脈注入阿奇霉素注射液（將本品用適量注射用水充分溶解，配制成0.1g/ml，再加入至250ml或500ml 的5%葡萄糖注射液中，最終阿奇霉素濃度為1.02.0mg/ml，然后靜脈滴注，1015mg/kg。）11（給藥途徑：頸內靜脈（給藥途徑：頸內靜脈）模模 型型 制制 備備組組 別別阿奇霉素阿奇霉素 7-10ml/kg乙乙兔兔尿蛋白尿蛋白尿沉
7、渣尿沉渣血漿尿氮量血漿尿氮量尿量尿量血壓血壓克拉霉素克拉霉素 7-10ml/kg取硝苯取硝苯地平注地平注射液，射液，靜脈靜脈滴滴注注。噪聲刺激噪聲刺激，每天，每天2次，每次次，每次2h，約，約10d,同時同時高鹽飲食高鹽飲食甲甲兔兔給給 藥藥 注：甲兔為注：甲兔為a組，乙兔為組，乙兔為b組組指標檢查指標檢查12（1）尿液沉渣的鏡檢 取自輸尿管收集的尿液5ml與離心管中，離心5mim（1500r/min）后，傾去上清液（供尿蛋白檢查用），離心管底部沉渣用適量生理鹽水稀釋（1:3）后搖勻，滴在載玻片上，涂勻后鏡檢。鏡檢是光線應較弱，先用低倍鏡將涂片全面檢視一遍，以免遺留管型等物體，再用高倍鏡檢視5
8、-10個視野，看是否有管型、結晶及血細胞等。（2）尿蛋白定性檢查 將尿液離心后的上清液約3ml放入試管中，用試管夾夾住試管，在酒精燈上加熱至沸騰（試管口應對著窗外或沒人的地方，并不斷轉動試管以免受熱不勻而炸裂），沸騰后加入5%醋酸3-5滴，再加熱至沸騰，然后在黑色背景下按標準判斷檢查結果13 將用草酸鉀做抗凝處理得血液離心5min（3000r/min）后分離出血漿，分為空白管（蒸餾水0.1ml加尿素氮顯色劑10.0ml）；標準管（尿素氮標準液0.1ml加尿素氮顯示劑10.0ml）；測定管(血漿0.1ml加尿素氮顯色劑10.0ml)，然后在沸水中加熱10min，取出置于冷水中冷卻，用752型紫外
9、分光光度計直接測定血漿中尿素氮的濃度（波長520nm），測定時一般用低標準液（含尿素氮20mg/100ml），當血漿尿素氮含量超過40mg%（14.28mmol/l）時換用高標準液（含尿素氮50mg/100ml）14動物 實驗前動脈（kpa）注射藥物后血壓（kpa）血漿尿氮量（mg/ml）尿蛋白（%）尿沉渣 尿量（ml）對照兔 實驗兔 151.2.3.4.教學中可分組進行a組和b組的實驗，但應選擇體重相近、性別相同的家兔，體重相差不能超過250g，實驗結束后將兩組結果進行統計對照。實驗中要注意保持家兔呼吸道通暢，并做好搶救準備工作。實驗前一定要做好壓力換能器的定標工作，以保證所測血壓的準確性。
10、實驗中不要再隨意進行“零點設置”和改變通道的放大倍數。實驗中動物需要進行全身肝素化，所以手術操作應輕柔、準確，盡量減少手術出血和不必要的創傷。165.6.7.8.實驗前要對離心管做抗凝處理，可取2%草酸鉀溶液0.1-0.2ml于離心管中均勻涂布后蒸干備用。對于注射器的抗凝處理，可簡單地先吸取一定量的草酸鉀溶液后排出，再用來取血。取血后要取下注射針頭，迅速將血液沿管壁加入經抗凝處理的離心管中，并立即輕輕混勻，以防血液凝固和溶血。不可直接用草酸鉀溶液與血液混合進行抗凝。尿液加熱時應緩慢轉動試管，逐漸加熱升溫，盡量避免受熱不均。試管口不可對人，以免造成意外事故。如果輸尿管中能收集到尿液，則用該尿液做尿常規檢驗，如果收集不夠，則用自膀胱中抽取的尿液做尿常規檢驗。17 處理因素作用后，血壓下降，后來因為腎功能嚴重損傷，血壓上升；尿沉渣鏡檢可見粗大顆粒管型，少數紅、白細胞；尿蛋白+（即尿蛋白質的大約含量為0.05-0.20；0.20-0.50）甚至0.50以上；血漿尿素氮急性升高1819
鈣通道阻滯劑與克拉霉素同時使用對急性腎損傷的風險ppt課件
